實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

銥 Ir 35% in HCl犬透明質酶4(HAase 4)免疫試劑盒E3泛素蛋白連接酶EDD抗體NEDD4L/NEDD4-2  泛素連接酶NEDD4-2抗體

銥粉 99.99% metals basis犬透明質酶3(HAase 3)免疫試劑盒胚胎外胚層發育蛋白EED抗體NEDD4  神經前體發育下調蛋白4抗體

銥粉 99.9% metals basis犬透明質酶2(HAase 2)免疫試劑盒轉錄接頭蛋白EP300抗體NEDD1  神經前體表達蛋白1抗體

鋨粉 99.99% metals basis犬透明質酶1(HAase 1)免疫試劑盒內皮脂肪酶抗體Nectin 4  脊髓灰質炎病受體相關蛋白4抗體

鋨粉 99.9% metals basis犬透明質(HA)免疫試劑盒MYC啟動子結合蛋白1抗體Nectin 3/CD113  粘附分子3抗體（脊髓灰質炎病受體相關蛋白3）

 AR,99.95%犬特殊團成分(維生素D結合蛋白)(GC)免疫試劑盒內質網蛋白29抗體Nectin 2/CD112  粘附分子CD112抗體

海綿鉑 99.95%犬髓過氧化物酶(MPO)免疫試劑盒烯脂酰輔酶A水解酶抗體Necdin  生長抑制蛋白NDN抗體

海綿鉑 99.99%犬松弛肽/松弛素(RLN)免疫試劑盒化4E結合蛋白1抗體Nebulin  伴肌動蛋白抗體

海綿鈀 99.95% metals basis犬水通道蛋白5(AQP5)免疫試劑盒三羥酰輔酶A脫氫酶抗體Nebulette  肌動蛋白結合蛋白Z盤狀蛋白抗體

海綿鈀 99.99%犬雙氫睪酮(DHT)免疫試劑盒限制過度增殖相關蛋白EML4抗體NDUFV2  NADH脫氫酶黃素蛋白2抗體

釕粉 99.9% metals basis犬視黃結合蛋白4(RBP-4)免疫試劑盒ETS1相關蛋白2抗體NDUFV1  NADH脫氫酶黃素蛋白1抗體

釕標準溶液 1000μg/ml犬生長激素(GH)免疫試劑盒EFHA1蛋白抗體NDUFS4  線粒體復合物NDUFS4蛋白抗體

釕粉 99.99% metals basis犬腎損傷分子1(Kim-1)免疫試劑盒化轉錄因子E2F-1抗體NDUFS3  線粒體復合物NDUFS3蛋白抗體

三化銠，水合 Rh 38.5-42.5% 犬腎素(Renin)免疫試劑盒EFHC1蛋白抗體NDUFS1/NADH dehydrogenase (ubiquinone) FeS protein 1 (75kD)  線粒體復合物NDUFS1蛋白抗體

三化釕 水合物 38.0-42.0% Ru basis犬腎上腺髓質素(ADM)免疫試劑盒EFHC2蛋白抗體NDUFAF4  激素調節增值相關蛋白抗體
乙醇酸氧化酶G蛋白偶聯受體124抗體（腫瘤血管內皮標記物）PNAT/NAT2/FITC  熒光素標記N-乙酰轉移酶2抗體IgG

半糖凝集素1抗體Natrexone/FITC  熒光素標記兔抗納曲酮抗體IgG