熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
纖維素酶(酶活>45 U/mg)Phospho-EphA2 (Tyr588) (D7X2L) Rabbit mAb芐基嗎啉-2-甲

氯化十六烷基吡啶一水(分子生物學(xué)級)SignalSilence® γ-Canin siRNA II (Mouse Specific)(R)-哌-2-羧酸

醋酸鉛三水(>99%，BC)MDR1/ABCB1 (D3H1Q) Rabbit mAb2-溴-氨基-6-甲基吡啶

派洛寧Y(Ind Grade)AFAP1L2/XB130 (D1B5) Rabbit mAb雙酚酸

對羥基甲酸鈉(>99%,BR)Phospho-MCM3 (Ser112) (D3S4M) Rabbit mAb2-(2-吡啶酮-1-基)-1,1,3,四甲基脲四氟酸鹽

魚精蛋白硫酸鹽來源于鮭魚 VEGF Receptor 2 (D5B1) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)羥基-三氟

5-溴-氯-吲哚基酸鹽鈉鹽(分子生物學(xué)級)His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)甲基-酮基-N-基戊酰

乙酸銅水合物(>99%，BR)xCT/SLC7A11 (D2M7A) Rabbit mAb甲基-5-

酸肌酸鈉鹽四水SignalStain® Apoptosis (Cleaved Caspase-3) IHC Dection Kit3,5-二氟-基酚

3,3'-二氨基聯(lián)四鹽酸二水(>99%，BR)Phospho-Akt (Ser473) (D9W9U) Mouse mAb3,5-二氟乙酮

1,6-二酸果糖三鈉鹽(98-101.0%，BR)Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (HRP Conjuga)2-甲基戊

1,6-二酸果糖三鈉鹽(98-101.0%，BR)β-Arrestin 1 (D8O3J) Rabbit mAb對乙基酚

銨(>99%，BR)His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb2-(甲基氨基)乙基氨酸叔丁酯

四甲基對鹽(>99%，BR)His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb1-Boc-吡咯烷甲酸甲酯

1,3,5-三羥基二水合物(>98%，BR)XPC Antibody4,二氟環(huán)己甲酸

碳酸無水(>98%，BR)XPC AntibodyFmoc-L-谷氨酸-α-芐酯

牛磺酸(>98.5%，JP )Prosta Specific Membrane Antigen (D4S1F) Rabbit mAb氨基-6-氯-1,二磺酰

草酸銨(98~101%,BR)IL-1β (D3U3E) Rabbit mAb正戊(烷)基酸
雙歧桿菌屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒山羊白介素6(IL-6)ELISA試劑盒phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185)  酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體100 ul

山羊白介素4(IL-4)ELISA試劑盒phospho-ERK1(Thr202/Tyr204)  酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體100 ul

山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒ERK1/2(p44/42 MAPK)  絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體100 ul

山羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204)  酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體100 ul

山羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒phospho-ERK1(Thr202/Thr204)+ERK2(Thr183/Tyr185)  酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體100 ul

山羊白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒phospho-ERK1(Thr197/Thr202)  酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體100 ul

山羊白介素18(IL-18)ELISA試劑盒Eph receptor B2/Ephb2   Ephb2抗體1 Kit

山羊白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒ERK1/MAPK3  絲裂原活化蛋白激酶3抗體100 ul

山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒MAPK4  絲裂原活化蛋白激酶4抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。