實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

金絲/金粉 99.99%犬凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)免疫試劑盒化4E結合蛋白1抗體NCOA3/KAT13B/AIB1/SRC-3  類固受體激活蛋白3抗體

化鈀  Pd 59-60%犬凝聚素(CLU)免疫試劑盒化4E結合蛋白1,2,3抗體NCOA2  類固受體激活蛋白2抗體

化金 Au≥52%犬腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)免疫試劑盒Epsin2B蛋白抗體NCKAP1  膜相關的蛋白質HEM2抗體

銀 99.95%，1.0μm犬內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)免疫試劑盒表皮生長因子抗體NCK2/Nck beta  NCK銜接蛋白2抗體

金鈉 金含量,48% 犬內皮素1(ET-1)免疫試劑盒表皮生長因子樣蛋白8抗體Nck1/NCK alpha  NCK銜接蛋白1抗體

硝銀 AR,99.8%犬內皮生長因子受體(EGFR)免疫試劑盒E3泛素連接酶抗體NCF1  嗜中性粒胞漿因子1抗體

二四氨鈀 Pd ≥43.0%犬內素(ET)免疫試劑盒小鼠抗表皮生長因子抗體NCF/NCF4/p40phox  嗜中性粒胞漿因子4抗體

海藻鈉 CP，粘度200±20mpa.s犬繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)免疫試劑盒抗表皮生長因子抗體NCEH/AADACL1  中性膽固酯水解酶1抗體

鉑 六水合物 AR,Pt ≥37.5%犬免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒內皮受體蛋白酪氨激酶A2+A3+A4抗體NCE2  泛素結合酶E2F抗體

二二氨鈀 Pd ≥50% 犬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒化內皮受體蛋白酪氨激酶A2+A3+A4抗體NCC27/CLIC1  離子通道蛋白27抗體

三化金水溶液 Au 23.5～23.8%犬免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒化內皮受體蛋白酪氨激酶A3+A4+A5抗體NCAM2  神經粘附分子2抗體

鉑 98%犬免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒轉錄因子Ets差異因5抗體NBL1/DAND1  神經母瘤抑瘤蛋白1抗體

海綿鈀 99.95% metals basis犬硫雌酮(E1S)免疫試劑盒E選擇素抗體Nav1.5/SCN5A  電壓門控鈉通道5α抗體

海綿鈀 99.99%犬粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫試劑盒大腸桿菌耐熱性腸素抗體Natriuretic Peptide Receptor A  利鈉肽受體A抗體

海綿鈀 99.999%犬類胰蛋白酶免疫試劑盒泛素激活酶E1抗體Natrexone  納曲酮抗體IgG
果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)特異性囊腫病液體蛋白15抗體NBS1/FITC  熒光素標記DNA修復蛋白NBS1抗體IgG

B淋巴生發中心相關蛋白抗體Phospho-p95/NBS1 (Ser343) /FITC  熒光素標記化DNA修復蛋白NBS1抗體IgG