實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

黃芪皂苷 II  分析標準品，≥98%人SPARC相關模塊化鈣結合蛋白2(SMOC2)免疫試劑盒質分裂付出蛋白1抗體p70 S6 kinase beta  核糖體蛋白S6激酶1抗體

黃芪總皂苷 分析標準品，≥98%人SPARC相關模塊化鈣結合蛋白1(SMOC1)免疫試劑盒腦表皮生長因子跨膜蛋白DNER抗體p70 S6 kinase alpha  化核糖體p70 S6蛋白激酶抗體

黃芪皂苷I 分析標準品，≥98%人SMAD3 免疫試劑盒DUX3蛋白抗體P63 protein/P51A  P63 腫瘤抑制因抗體

鹽黃連堿 分析標準品，≥98%人SMAD2 免疫試劑盒死亡相關蛋白1抗體p58ipk  p58ipk抗體

野百合堿 分析標準品人SHC轉化蛋白1(SHC1)免疫試劑盒軸絲動力蛋白重鏈9抗體p55/DCAF1  染色質組裝因子1P55抗體

野百合堿 95%人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)免疫試劑盒化動力相關蛋白1抗體p53R2/RRM2B  核苷還原酶M2B抗體

千金藤素 分析標準品,≥98%(HPLC)人Seryl- tRNA合成酶，質(SARS/SERS)免疫試劑盒DNA連接酶4抗體p53BP1/53BP1  p53結合蛋白1抗體

白屈菜紅堿 分析標準品，>98% 人Salusin Beta(Salusin β)免疫試劑盒二肽肽酶6抗體p53AIP1  p53調節凋亡誘導蛋白1抗體

班蝥素 分析標準品，≥98%人Salusin Alpha(Salusin α)免疫試劑盒二氫葉還原酶抗體P53(wt-p53) (D2F7)  腫瘤抑制因野生型P53單抗

莪術 分析標準品，≥98%人SAA/LDL復合物 免疫試劑盒有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體P53(wt-p53)  腫瘤抑制因抗體（野生型P53）

五加皂苷B 分析標準品，≥98%人S100鈣結合蛋白P(S100P)免疫試劑盒有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體P53 protein(wt-p53)  腫瘤抑制因P53蛋白抗體（野生型P53）

告達亭甙元 分析標準品，≥98%人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)免疫試劑盒DOM3Z蛋白抗體p53 DINP1  p53誘導核蛋白1抗體

斷血流皂苷A 分析標準品，≥98%人S100鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)免疫試劑盒蓬亂蛋白2抗體p53 (FL-393)  腫瘤抑制因p53抗體

鼠尾草  分析標準品，≥92%人S100鈣結合蛋白A8/A9復合物(S100A8/A9)免疫試劑盒化蓬亂蛋白2抗體?p53 (DO-1)  腫瘤抑制因p53抗體

黃楊堿 分析標準品，≥99%人S100鈣結合蛋白A6/鈣粒蛋白A(S100A6)免疫試劑盒轉錄下調蛋白1抗體P4HB  蛋白二硫鍵異構酶P4HB抗體
植酸酶氧氣調節蛋白150抗體酯封端左旋聚(重均分子量206-288萬) Hydrazine sulfate

氧化應激反應蛋白1抗體酯封端左旋聚(重均分子量26-36萬) Cyclandelate

固生蛋白M抗體酯封端左旋聚(重均分子量3-5.5萬) Nitrilotriacetic acid

末端多聚腺苷1蛋白抗體酯封端左旋聚(重均分子量36-48萬) 1,3- Propylene Glycol

嗅球蛋白3抗體酯封端左旋聚(重均分子量48-73萬) Diethylene Glycol

轉錄因子OTX1抗體酯封端左旋聚(重均分子量5.5-9 萬) Chlorothiazide

轉錄因子OTX2抗體酯封端左旋聚(重均分子量73-102萬) 4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide

轉錄因子OTX1+OTX2抗體酯封端左旋聚(重均分子量9-17萬) Alkene

增食欲素B/欲激素B(3R,4R)-N,4-二-1-()-3-... N-Methylparoxetine

脊髓性肌癥蛋白Gemin7抗體MRP3/FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白3抗體IgG

GTP結合絲裂原誘導T蛋白抗體MRP4/ABCC4 /FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白4抗體IgG