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抗壞血酸氧化酶(AAO)試劑盒說明書

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更新日期:
2024-08-23
點擊次數(shù):
2296
產(chǎn)品特點:
抗壞血酸氧化酶(AAO)試劑盒說明書公司正在熱銷的產(chǎn)品:
牡荊CAS:3681-93-4全血基因組/線粒體DNA同步萃取試劑盒
膜相關(guān)環(huán)指11抗體純化線粒體DNA萃取試劑盒
10102-40-6鉬鈉純化線粒體總RNA萃取試劑盒
亮葉耳環(huán)根瘤菌純化線粒體DNA/RNA同步萃取試劑盒
  抗壞血酸氧化酶(AAO)試劑盒說明書的詳細資料:

公司產(chǎn)品僅用于科研測定步驟:

1、 酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水149稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

產(chǎn)品名稱:抗壞血酸氧化酶(AAO)試劑盒說明書

規(guī)格:48樣、96樣、

貨號:GOY-016373

檢測方法:紫外分光光度法、微板法

產(chǎn)品分類:ASA-GSH循環(huán)系列

貯存溫度:28℃

本試劑盒保質(zhì)期:6個月

圖片1.png 

【實驗前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復

溶液+1份去離子水)用于樣本的復溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

       :微孔板酶標儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮氣吹干裝

置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl100μl~1000μl、多道 250μl

           :乙腈、中性氧化鋁


3.png

 

選擇抗凝的注意點:

、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.40.5ml血漿);

、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

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山柑芽孢桿菌冰凍切片組織CASPASE-8表達熒光顯微鏡檢測試劑盒大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)A(SP-A)試劑盒

假單胞菌屬石蠟切片組織CASPASE-8表達熒光顯微鏡檢測試劑盒人15脂加氧(15-LO/LOX)試劑盒

繩狀籃狀菌載玻片細胞CASPASE-8表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒小鼠15脂加氧(15-LO/LOX)試劑盒

Bacillus 冰凍切片組織CASPASE-8表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)試劑盒

金針菇—HP3石蠟切片組織CASPASE-8表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒人骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒

黑孢霉細胞CASPASE-8表達比色法定量檢測試劑盒小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒

大腸埃希菌細胞CASPASE-8表達熒光定量檢測試劑盒大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒
抗壞血酸氧化酶(AAO)試劑盒說明書18-3A9檢測試劑盒腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA1抗體

血小板生成抗體檢測試劑盒腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA2抗體

絲氨;蘇氨激1檢測試劑盒胰高血糖抗體

水通道7檢測試劑盒線粒體甘油3基轉(zhuǎn)移抗體

水通道11檢測試劑盒脂基聚糖-6抗體

生長關(guān)聯(lián)43檢測試劑盒二羥基轉(zhuǎn)移抗體

接觸4檢測試劑盒囊性組織液體15抗體

CD166分子檢測試劑盒化接頭Gab2抗體

 


產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 抗壞血酸氧化酶 AAO 試劑盒
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