實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

乙 CP,98%人B7-H4 免疫試劑盒腺樣癌特異性相關抗原EMC1抗體NOX2/gp91phox  NADPH氧化酶2抗體

乙 色譜固定液，30℃人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)免疫試劑盒硫軟骨素蛋白多糖3抗體Nox1/NADPH oxidase 1  有絲分裂氧化酶1抗體

乙 Standard for GC, >99.5% (GC)人A組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)免疫試劑盒染色體區域穩定蛋白/核輸出蛋白1抗體Notch3/4  跨膜受體蛋白Notch-3抗體

乙  重蒸餾, ≥99.5%人A激酶PRKA錨定蛋白12(Akap12)免疫試劑盒化轉錄因子ELK1抗體Notch1/MOTC  跨膜受體蛋白Notch-1抗體

乙 99%，培養人AT豐富結合域1A(ARID1A)免疫試劑盒ETS相關蛋白71抗體Notch 2  跨膜受體蛋白Notch-2抗體

乙  ACS, ≥99.0%人Apelin 免疫試劑盒外胚層發育不良蛋白1抗體NOS-3/eNOS  一氧化氮合成酶-3抗體（內皮型）

乙二單己 98%人Apelin 36(AP36)免疫試劑盒ETV3L蛋白抗體NOS-2/iNOS  一氧化氮合成酶-2抗體（誘導型）

乙二單己 99%人apelin 13(AP13)免疫試劑盒酪氨蛋白激酶受體B6抗體NOS-2/iNOS  一氧化氮合成酶-2抗體（誘導型）

乙二丁 AR，99.0%人apelin 12(AP12)免疫試劑盒溶血脂受體蛋白1抗體Nonylphenol  壬酚抗體

間二 AR人AP-5復合物β亞(PP1030)免疫試劑盒溶血脂受體蛋白2抗體nonstructural protein 1/NS1  A型流感病-NS1抗體（神經氨酶1）

丁錫 Sn 56.5%±0.5%人alpha突觸核蛋白（淀粉樣前體非A4成分蛋白）低聚物(SNCA oligomer)免疫試劑盒溶血脂受體蛋白3抗體non-muscle Myosin IIA  非平滑肌肌球蛋白2A抗體

異丁酮  for HPLC, ≥99.5%人Alpha-D 酚/維生素E(Alpha-D TPL)免疫試劑盒內皮的分化蛋白6抗體NOL8  核仁蛋白8抗體

異丁酮 ACS, ≥98.5%人alpha-1腎上腺素能受體(ADRA1)IgG抗體免疫試劑盒外生性骨疣樣蛋白2抗體NOL1  增殖相關核仁抗原抗體

異丁酮 >99.5%(GC)人AFG3樣蛋白2(AFG3L2)免疫試劑盒化eIF4E結合蛋白抗體Nogo-B/A  軸索過度生長抑制因子-B/A抗體

異丁酮 CP,98.0%人Adropin(ENHO)免疫試劑盒化eIF4E結合蛋白抗體Nogo-A  軸索過度生長抑制因子-A抗體
丙酮酸羧化酶（PC）胰島素樣生長因子-II抗體車前子（車前）（標準品） Lecithin from egg

白介素10抗體車葉草苷（標準品） Vilanterol;GW642444

白介素13抗體沉香（標準品） PD-98059

白介素-17抗體沉香四 PLX-4720

白介素-18/干擾素γ誘導因子抗體陳皮（標準品） 1,1'-Carbonyldiimidazole

白介素1受體相關蛋白樣1前體蛋白抗體陳皮炭（標準品） LY2835219

白介素1β/IL-1β抗體橙黃決明素(標準品) LEE011

白介素2抗體（大、小鼠）橙皮（標準品） MG-132

白介素-2單克隆抗體橙皮苷(標準品） Dictamnine

G蛋白偶聯受體GPR63蛋白抗體mucin 5B/Muc5B/FITC  熒光素標記粘蛋白-5B抗體IgG

化珠蛋白轉錄因子1抗體MUC5AC/Mucin 5AC /FITC  熒光素標記胃粘液素抗體IgG