PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
L-甘氨酸甲酯鹽酸鹽TNF-R2 Antibody2-氟-甲氧基甲酸

D-氨酸乙酯鹽酸鹽Sox2 (C70B1) Rabbit mAb (IHC Preferred)()-羥基哌啶

利格列汀;利拉利汀OSR1 Antibody1-(2-)哌

L-谷氨酸-α-芐酯Caspr2 Antibody1-芐基-氧雜-哌啶甲酸乙酯

L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽GP130 Antibody1-氯甲酰基-甲基哌

L-氨酸芐酯對甲磺酸鹽Phospho-MLKL (Ser345) (D6E3G) Rabbit mAb2-(三氟甲基)芐溴

L-氨酰鹽酸鹽NPRL2 (D8K3X) Rabbit mAb哌啶-甲酰

L-組氨酸鹽酸鹽NF-κB2 p100/p52 (D7A9K) Rabbit mAb四溴噻吩

L-高精氨酸鹽酸鹽MCM7 (D10A11) XP® Rabbit mAb對溴芐

氨基酸甲酯鹽酸鹽MCM7 (D10A11) XP® Rabbit mAb1,1-環(huán)烷二甲

TPCK(進(jìn)分)TNF-R1 (C25C1) Rabbit mAb氯-甲酸

TPCKTNF-R1 (C25C1) Rabbit mAb氯-2-氨基吡啶

D-纈氨酰-L-亮氨酰-L-賴氨酸-對-PHF8 (E9R4F) Rabbit mAb2-氨基-間二甲酸

谷二肽,L--谷二肽,力肽SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb溴喹啉

L-精氨酸甲酯SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAbN-Boc-溴乙

D-氨酰鹽酸鹽Beclin-1 Antibody2-氯-硝

硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑Myc-Tag (9B11) Mouse mAb (PE Conjuga)2-氨基-異鄰二甲酸

1-芐基D-谷氨酸SDF1 Antibody叔丁基氯化
鴨肝炎病毒通用探針法熒光PCR檢測試劑盒單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4)ELISA試劑盒phospho-Src(Tyr529)  酸化Src原癌基因抗體100 ul

單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒phospho-Src (Tyr418)  酸化Src原癌基因抗體100 ul

單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒SRF/SAP2/MCM1  生長激素釋放因子抗體(血清應(yīng)答因子)20 ul

單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒Phospho-SRF (Ser103)  酸化生長激素釋放因子抗體(血清應(yīng)答因子)100 ul

單氧化酶(MAO)ELISA試劑盒SREBP-1  膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體100 ul

大內(nèi)皮素1ELISA試劑盒SREBP-2  膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體100 ul

催素(PRL)ELISA試劑盒srGAP3  精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體100 ul

催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒synaptotagmin-2  突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體100 ul

促胰液素/胰泌素(Sct)ELISA試劑盒Synaptotagmin-4  突觸結(jié)合蛋白4抗體100 ul